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QUALITY CONTROL
CORPORATE CULTURE
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质量是四季青的根本
59305小鱼儿论坛将本着锐意进取的精神,依旧贯彻四季青品牌“质量第一、精益求精、务实创新、诚信经营”的宗旨,生产出更好、更稳、更安全的产品,向牛血清的精品化持续迈进。公司按照2015年版现行《全国牛血清生产企业达标检查手册》要求,对软件、硬件分别进行了修改与补充。
常见问题
COMMON PROBLEM
DO YOU EXPERIECE THESE PROBLEMS?
您是否遇到这些问题?
牛血清常见问题 黑胶虫 平皿常见问题解答
  • 01
    要不要对血清进行热灭活?
    一般以56℃、30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
    实验显示,即使对血清进行正确的热灭活处理,对大多数的细胞而言也是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。
    而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。
    因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保您的血清的质量。
  • 02
    血清应该如何解冻?
    我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
  • 03
    血清应该如何保存?
    我们建议血清应保存在-10℃~-30℃。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
  • 04
    血清有沉淀该怎么办?
    血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以1000转/分~2000转/分稍微离心,上清液即可直接加入培养基内使用。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
    我们建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭活血清及长时间的将血清置于高温环境中。
  • 05
    牛血清的主要成份
    蛋白质是牛血清中主要成份之一。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白,球蛋白,纤维粘连素(细胞促进细胞附着),α2巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用);胎牛血清中含胎球蛋白(促细胞附着)转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)。
    多肽:血小板促生长因子能促细胞分裂,是多肽家庭的主要成员之一,是主要的促细胞增殖因子;成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,血清中含量虽很少,但对细胞生长也有一定作用。

    激素:激素对细胞的作用是多方面的。
    胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关。
    类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用。
    促生长激素:促细胞增殖效应。
    氢化可的松:血清中含有定量的该成分,它可能兼有促细胞贴附和增殖作用,但有人证明,血清中的氢化可的松,如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分化。

    其他成份
    氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大。与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。
  • 06
    ★选择适合自己细胞培养的牛血清的最简单方法
    由于牛血清的批间差异和细胞种类不同,因此要找到一批适合自己用的牛血清的最简单有效的方法是——用户在购买牛血清前先试用样品,通过筛选得到自己满意的牛血清批号,然后把整个项目所需的牛血清一次买足,保持整个项目所需牛血清质量的一致性,这样能够确保项目如期顺利完成。
  • 下拉更多
  • 01
    血清中为什么会出现“小黑点”?
    在培养细胞的过程中所发现的“运动微生物”,国内研究者习惯叫作“黑胶虫”或“焦虫”。早在1992年就有人提出在细胞培养中发现此小黑颗粒。它可以在400倍显微镜或更高倍镜下观察到,在显微镜下是半透明的圆点,分布在细胞间隙,作上下翻转运动。
    经过热灭活的血清,沉淀物的形成会显著增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更加增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。此小颗粒在细胞培养过程中有增多的现象,但培养液不混浊,细菌、真菌等微生物检查均为阴性,对细胞的影响程度根据细胞种类和状态的不同不完全相同,这些小颗粒是因血清中的蛋白质凝聚析出造成的,对细胞的培养效果总体影响不大。
  • 01
    目前我国尚未有一次性培养基平皿统一的质量标准,作为用户在购置培养基平皿时该如何选择 厂家?
    首先,根据国食药监械[2008]535 号文件摘选中培养基产品分类界定,培养基产品划分在医疗器械管理范畴。
    其次、2013 年 11 月 26 日,国家食品药品监督总局在《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》中将培养基类产品划分在《6840 体外诊断试剂分类子目录(2013 版)》。
    第三、2014 年 9 月 5 日,国家食品药品监督总局在《关于医疗器械生产质量管理规范执行有关事宜的通告》第四点中指出“自 2018 年 1 月 1 日起,所有医疗器械生产企业应当符合医疗器械生产质量管理规范的要求”。
    综合以上三点,说明我国已从法规上对培养基类生产作出明确规定,所以在选择培养基平皿供应商时,首先要选择合法合规的生产企业。
  • 02
    成品预装培养基平皿是否需要预培养?
    根据 2020 版《中国药典》第四部 9203 药品微生物实验室质量管理指导原则中要求:“用于环境监控的培养基须特别防护,最好要双层包装和终端灭菌,如果不能采用终端灭菌的培养基,那么在使用前应进行 100%的预培养,以防止外来的污染物带到环境中及避免出现假阳性结果”。目前市场上的一次性培养基平皿产品都是最终灭菌产品,所以使用前不需要预培养。
  • 03
    若三层真空包装的一次性培养基平皿在使用过程中发现涨袋,能否继续使用?
    建议不要带进洁净区使用,特别是 A、B 级区,会给洁净区环境带来污染风险。
  • 04
    实验室自制培养皿灭菌后为何会出现水汽太多的现象?
    原因有两个:第一、浇注平皿时培养基温度太高,而浇注后没有冷却至室温就盖上盖子;第二、灭菌柜的干燥性能不佳造成。
  • 05
    一次性培养基平皿沉降菌采样后为何会出现培养基缩板的现象?
    如果洁净区的温湿度(温度:18℃~22℃;相对湿度控制在 45%~65%;风速小于0.54m/s)没有特殊要求,沉降菌采样后缩板,可能是一次性平皿的质量问题;如果洁净区的温湿度有特殊要求,则要根据验证来确定在沉降菌采样时平皿的暴露时间。